Оценка экспрессии поверхностных маркеров активации лимфоцитов и продукции секреторного иммуноглобулина А в процессе формирования противохолерного иммунитета

Филиппенко А.В., Иванова И.А., Омельченко Н.Д., Труфанова А.А.

ФКУЗ Ростовский-на-Дону противочумный институт Роспотребнадзора, Ростов-на-Дону

Целью работы являлось изучение экспрессии маркеров активации лимфоцитов периферической крови и продукции секреторного иммуноглобулина А (sIgA) в тонком кишечнике белых мышей, вакцинированных противохолерной вакциной и получавших иммуномодуляторы. Для этого белым мышам при вакцинации однократно вводили азоксимера бромид, глюкозаминилмурамилдипептид, дезоксирибонуклеат натрия. Экспрессию маркеров активации лимфоцитов у лабораторных животных осуществляли на 3-21 сутки поствакцинального периода. Клетки после лизиса окрашивали моноклональными антителами к СD45, CD23, CD38 и CD69 («Invitrogen», США) мыши и анализировали на проточном цитометре «NaviosТМ» («Beckman Coulter», США). Количество sIgA определяли в промывных водах тонкого кишечника мышей с помощью набора «Enzyme-linked immunosorbent assay kit for sIgA» (США) на многофункциональном ридере «SynergyТМ 2» на 5-21 сутки после прививки. Протективную активность вакцины и влияние иммуномодуляторов на этот процесс оценивали на 21 сутки после иммунизации, вызывая генерализованную форму холеры у белых мышей. Выявлено увеличение экспрессии CD69, CD38 и CD23 на поверхности лимфоцитов у вакцинированных экспериментальных животных. Введение азоксимера бромида и глюкозаминилмурамилдипептида приводило к повышению числа CD69, начиная с первых этапов исследования и до конца эксперимента. Под влиянием дезоксирибонуклеата натрия синтез этого рецептора также усиливался, но менее интенсивно. В большей степени и более ранние сроки азоксимера бромид и глюкозаминилмурамилдипептид способствовали увеличению числа CD23 на мембранах иммунокомпетентных клеток вакцинированных белых мышей. Достоверное по отношению к иммунизированным животным повышение числа CD38 наблюдалось нами только под влиянием азоксимера бромида, начиная с первой недели и до конца периода наблюдения. Показано, что применение иммуномодуляторов, особенно азоксимера бромида и глюкозаминилмурамилдипептида, способствует увеличению синтеза sIgA, основного эффектора слизистого иммунитета, в тонком кишечнике вакцинированных животных. Обнаружено наличие коррелятивных связей между напряжённостью противохолерного иммунитета, продукцией sIgA и уровнем экспрессии маркеров активации, особенно CD69 и CD23 и при использовании азоксимера бромида и глюкозаминилмурамилдипептида.