Показатели клеточного иммунитета и метаболизм лимфоцитов у детей с аутоиммунным гепатитом первого типа при разных стадиях фиброза печени

Курбатова О.В., Мовсисян Г.Б., Петричук С.В., Купцова Д.Г., Демьянов Д.C., Парахина Д.В., Радыгина Т.В., Семикина Е.Л., Потапов А.С., Анушенко А.О., Фисенко А.П.

Национальный медицинский исследовательский центр здоровья детей, Москва
Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова, Москва

Аутоиммунный гепатит (АИГ) – это прогрессирующее гепатоцеллюлярное воспаление неясной этиологии, сопровождающееся процессом фиброза печени (ФП). Повреждения в печени ассоциированы с образованием высокореактивных молекул, которые содержат неспаренные электроны (свободных радикалов), которые, в свою очередь, индуцируют перекисное окисление липидов, что приводит к развитию митохондриальной дисфункции. Митохондриальные DAMP, высвобождаемые из поврежденных митохондрий гепатоцитов (с мтДНК в качестве основного активного компонента), непосредственно активируют звездчатые клетки печени и вызывают рубцевание печени. Оценку клеточного метаболизма можно проводить, исследуя активность сукцинатдегидрогеназы (СДГ) – ключевого фермента, который участвует как в цикле трикарбоновых кислот, так и в OXPHOS. Цель работы: изучить показатели клеточного иммунитета и активность СДГ в популяциях лимфоцитов на разных стадиях фиброза печени у детей с АИГ I типа.
Материалы и методы. В рамках госпитализации обследовано 69 детей с АИГ I типа в возрасте от 12 до 18 лет, Ме=15,5 [12,8;16,9]. 62 здоровых ребенка составили группу сравнения. С помощью аппарата FibroScan F502 проводили оценку стадии фиброза печени. Методом проточной цитометрии проводили оценку субпопуляционного состава лимфоцитов и активности СДГ в них. Оценивали популяции лимфоцитов: Т-лимфоциты, активированные Т-клетки, В-лимфоциты, NK-клетки, СD16/56+CD3+лимфоциты, цитотоксические Т-лимфоциты, Т-хелперы, включая малые популяции: активированные Т-хелперы, регуляторные Т-клетки, Тh17-лимфоциты. Для статистической обработки данных использовали программу Statistica 10.0 (США).
Результаты. Исследование включало 47 девочек и 22 мальчика. Дети с АИГ находились на стандартной терапии глюкокортикостероидами в течение 2,6 [1,1;5,4] лет. У 53 детей АИГ протекал в сочетании с гастродуоденитом (76,8% наблюдений), у 12 детей – с гастроэзофагеальной рефлюксной болезнью (17% наблюдений). У 7 детей отмечались коморбидные аутоиммунные заболевания или их комбинация: у 5-ти пациентов - аутоиммунный тиреоидит (7% наблюдений), у 2-х детей – витилиго (3% наблюдений), а также сахарный диабет 1 типа, ювенильный ревматоидный артрит и целиакия по одному случаю (1,5%). У 3-х детей (5% наблюдений) отмечен множественный аутоиммунный синдром. У детей с АИГ выявлено увеличение относительного содержания Т-клеток, Т-хелперов. Относительное количество NK-клеток и В-клеток было снижено при всех стадиях ФП относительно группы сравнения. Получено значимое увеличение абсолютного количества Тhact и Treg при всех стадиях фиброза относительно группы сравнения, тогда как относительное количество Тhact (% CD4+) было достоверно выше только на стадиях F0,F3 и F4, а относительное количество Treg (% CD4+) достоверно выше только на стадиях F0 и F4. Доля Тh17-лимфоцитов (% CD4+) была достоверно снижена относительно группы сравнения на стадиях F0 и F2. От стадии F0 к F3 относительное количество В-клеток снижалось, а затем к стадии F4 достоверно увеличивалось. Доля Т-хелперов, Treg и Тhact у большинства пациентов была выше группы сравнения, однако, достоверных отличий между разными стадиями не было выявлено. Доля Тh17-лимфоцитов повышалась с увеличением стадии фиброза печени, максимальные значения выявлены на стадии F4. Исследование СДГ выявило достоверное снижение активности этого фермента во всех популяциях лимфоцитов. Наибольшее снижение активности выявлено в двойных негативных CD3+CD4-CD8-клетках на 18,5% и NK-клетках на 17,5% относительно группы сравнения. В популяциях Тh17 и Treg лимфоцитов активность СДГ была достоверно ниже в состоянии обострения заболевания, относительно состояния ремиссии. Анализ показателей активности СДГ в зависимости от стадии фиброза печени выявил нелинейную зависимость: в популяциях Т-хелперов, Т-цитотоксических и Тhact – увеличение к стадии F2-3, а затем снижение к стадии F4. Активность СДГ в популяции Тh17-лимфоцитов максимально повышалась на стадии F1 и с последующим снижением к стадии F4. С увеличением стадии фиброза печени достоверно увеличивалась активность СДГ в популяции Treg, однако не достигала нормативных значений. Дети с аутоиммунным гепатитом нуждаются в диспансерном наблюдении и строгом контроле развития заболевания.
Заключение. Субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови и активность СДГ в популяциях лимфоцитов объективно отражают тяжесть состояния пациента на момент обследования и могут быть использованы для дополнительной лабораторной оценки прогрессирования фиброза печени. Выявленные признаки митохондриальной дисфункции обосновывают применение коррекции метаболических нарушений в качестве терапии, улучшающей основное лечение пациентов с АИГ 1 типа.