Каталитическая гетерогенность иммуноглобулинов класса G c пероксидазной активностью, выделенных из крови здоровых крыс Wistar

Ихмянган Э.Н., Василенко Н.Л., Синицина О.И., Бунева В.Н., Невинский Г.А.

1Институт химической и фундаментальной медицины Сибирского отделения Российской академии наук
2Институт цитологии и генетики Сибирского отделения Российской академии наук

Нами недавно показано, что поликлональные IgG антитела (АТ) из крови здоровых крыс Wistar обладают пероксидазной активностью, подобной таковой у пероксидазы хрена. В присутствии перекиси водорода эти АТ способны с высокой эффективностью окислять 3,3'-диаминобензидин (ДАБ). В данной работе впервые проведен анализ каталитической гетерогенности препаратов АТ из крови различных крыс в реакции окисления ДАБ. Показано, что пероксидазную активность могут проявлять не только интактные IgG, но также изолированные легкие и тяжелые цепи поликлональных препаратов АТ. АТ выделенные из крови как одной, так и разных крыс эффективно окисляют ДАБ в широких диапазонах рН (5,0 –9,0) и концентраций Н2О2 (0,1 до 50 мМ), демонстрируя несколько выраженных оптимумов рН и дискретных колоколообразных зависимостей скорости реакции от концентрации субстрата. IgG от разных крыс могут отличаться на порядок по содержанию связанных с ними ионов Fe, Cu, Ni, Co, Mn, Mg, Ca, Zn и частично теряют эти ионы при выделении. Показано, что пероксидазная активность АТ зависит от экзогенных ионов металлов и при их добавлении, особенно Fe2+и Cu2+, может возрастать в 2-10 раз. При хроматографии на Chelex-100 IgG, связанные с металлами, разделяются на несколько субфракций абзимов, отличающихся по сродству к этому хелатирующему сорбенту. Уровень активности абзимов очень сильно зависит от типа и концентрации добавляемых экзогенных ионов металлов. Совокупность полученных данных свидетельствует о каталитической гетерогенности абзимов крыс с пероксидазной активностью.