Аранжировка иммуноферментного метода, обеспечивающая снижение фоновых неспецифических взаимодействий сывороточных иммуноглобулинов с антигенами B. pseudomallei

Новицкая И.В., Терешко Д.Л., Печенкина Л.А.

ФКУЗ Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт Роспотребнадзора, Волгоград

Цель исследования: подбор условий проведения иммуноферментного анализа (ИФА), обеспечивающих достоверное снижение фоновых значений реакции, направленной на выявление сывороточных мелиоидозных антител.

Материалы и методы. При выполнении ИФА варьировали типы планшетов, блокирующие свободные поверхности лунок агенты, а также буферы для разведения проб и сенситина. Образцами для исследования служили сыворотки интактных и заражённых B. pseudomallei лабораторных животных, а также сыворотки человека, полученные от клинически здоровых лиц, проживающих на эндемичной по мелиоидозу территории и вне её.

Результаты и обсуждение. Специфическое выявление мелиоидозных антител в сыворотках экспериментальных животных, а также снижение фоновых взаимодействий в ходе исследования интактных сывороток человека достигнуто при блокировании свободных поверхностей лунок 5%-ным раствором сухого обезжиренного молока, а также использовании фосфатно-солевого буфера (рН 7,4) – для сенсибилизации пластин и многокомпонентного Tris-HCl буфера (pH 8,0), содержащего в своём составе этиленгликоль, бычий сывороточный альбумин, хлорид натрия и Tween 20 – для разведения образцов. Обсуждается вопрос о возможности использования ИФА в предлагаемом варианте для иммунодиагностики мелиоидоза.